UA-82266412-1

Metode Analisis Mikroba Penambat N (Nitrogen): Azotobacter sp dan Azospirillum sp

Tanah merupakan media tempat tumbuhnya tanaman yang harus mengandung unsur hara dan air yang cukup untuk mendukung pertumbuhan tanaman. Salah satu unsur hara yang penting untuk tanaman adalah unsur nitrogen (N) yang terdapat secara bebas di udara. Agar jumlah unsur nitrogen di tanah dapat terpenuhi, maka diperlukan bantuan mikroba yang dapat menangkap nitrogen bebas dari udara atau disebut juga mikroba penambat N. Azospirillum sp dan Azotobacter sp merupakan mikroba penambat N yang biasa digunakan sebagai mikroba dalam pupuk hayati. Tentu saja jumlah populasi kedua mikroba penambat N tersebut harus memenuhi spesifikasi pupuk hayati yang telah ditentukan, maka dari itu diperlukan metode analisis untuk menentukan jumlah populasi mikroba penambat N tersebut.

azotobacter

Metode Analisis Mikroba Penambat N: Azotobacter sp

Metode Plate Count
A.Peralatan
a.Labu erlenmeyer
b.Tabung reaksi
c.Cawan petri
d.Pipet mikro 1000 µl dengan tip steril
e. Inkubator 36 ± 1oC
B.Perbenihan dan larutan pengencer
a.Larutan garam fisiologis (NaCl 0,85%)
b.Media LG
komposisi per liter: (Dobereiner,1970).
• K2HPO4…………………………………………………….0,05 g
• KH2PO4…………………………………………………….0,15 g
• MgSO4.7H2O…………………………………………….0,2 g
• CaCl2…………………………………………………………0,02 g
• CaCO3………………………………………………………..1 g
• NaMoO4.2H2O…………………………………………..1 g
• FeCl3 10% (pelarut aquades)……………………..1 tetes
• Bromthymol blue 0,5% (pelarut ethanol)…..10 ml
• Sukrosa………………………………………………………20 g
• Agar……………………………………………………………20 g
Sesuaikan pH menjadi 7
C.Cara kerja
a.Lakukan homogenisasi sampel.
b.Buat seri pengenceran sampai dengan 1:1000000.
c.Pipet masing-masing 1 ml sampel pada pengenceran 10-4 dan 10-6 ke dalam cawan petri steril.
d.Tuangkan media LG yang telah steril dengan suhu ± 50oC.
e.Goyangkan cawan petri secara perlahan hingga cairan sampel dan media tercampur rata kemudian biarkan campuran membeku.
f.Inkubasikan cawan petri dengan posisi terbalik ke dalam incubator pada suhu 36 ± 1oC selama 3-5 hari.
g.Hitung koloni Azotobacter sp yang tampak setelah inkubasi dengan ciri khas sesuai dengan jenisnya. Azotobacter chroococum tampak setelah 24 jam inkubasi dengan ciri putih basah setelah 3 – 5 hari berubah menjadi coklat. Azotobacter vinelandii dan koloni azomonas setelah 24 jam inkubasi dengan ciri putih basah setelah 3 – 5 hari tidak berubah menjadi coklat gelap. Azotobacter paspali tampak setelah 48 jam inkubasi dengan ciri putih basah dan menjadi kuning di pusat koloni yang disebabkan oleh adanya asimilasi bromthymol blue dan pengasaman.

azos

Metode Analisis Mikroba Penambat N:

Azospirillum sp

Metode MPN (5 tabung)
A.Peralatan
a.Labu erlenmeyer
b.Tabung reaksi
c. Pipet mikro 1000 µl dengan tip steril
d. Inkubator 36 ± 1oC
B.Perbenihan dan larutan pengencer
a.Larutan garam fisiologis (NaCl 0,85%)
b.Media NFB semi padat
komposisi per liter: (Dobereiner, 1991)
• Asam Malat ………………………………………………….5,0 g
• K2HPO4 ……………………………………………………….0,5 g
• MgSO4.7H2O ………………………………………………..0,02 g
• Minor element solution ………………………………….2 ml
(CuSO4.5H2O 0,4 g; ZnSO4.7H2O 0,12 g;
H2BO3 1,4 g; Na2MoO4.2H2O 1,0 g
ditera menjadi 1 liter dengan aquades)
• Bromthymol Blue Soln 0,5 in 0,2 N KOH ………2 ml
• Fe EDTA 1,64 %…………………………………………… 4 ml
• KOH secukupnya untuk mengatur pH 6,8
• Vitamin soln…………………………………………………. 1 ml
(Biotin 10 mg dan Pyriodoxol-HCl 20 mg
ditera menjadi 100 ml dengan pelarut aquades)
• Agar ………………………………………………………………1,75 g
Catatan:
Bahan – bahan ditambahkan secara berurutan.
C.Cara kerja
a.Lakukan homogenisasi sampel.
b.Buat seri pengenceran sampai dengan 1:100000.
c.Pipet 1 ml pengenceran 1:10 (10-1) ke dalam masing-masing 5 tabung yang berisi 5 ml NFB semi padat.
d.Lakukan juga dengan cara yang sama terhadap pengenceran 1:100 (10-2) pada 5 tabung kedua dan 1:1000 (10-3) pada 5 tabung ketiga dan 1:10000 (10-4) pada 5 tabung keempat dan 1:100000 (10-5) pada 5 tabung kelima (tiap pengenceran pergunakan tip yang baru dan steril).
e.Inkubasikan semua tabung dalam keadaan terang pada suhu ruang selama 5-7 hari.
f.Setelah 7 hari catat jumlah tabung yang membentuk pelikel berwarna putih pada permukaan media.
g.Catat tabung positif Azospirillum sp
h.Angka paling mungkin dari Azospirillum sp dapat dilihat pada tabel MPN.

{ Leave a Reply ? }

  1. Kathryne Alphin

    Thank you, I have just been looking for information about this subject for ages and yours is the greatest I’ve discovered so far. But, what about the conclusion? Are you sure about the source?

  2. Math problem solver

    There is certainly a great deal to learn about this topic.
    I love all the points you made. math-problem-solver,
    At this time it sounds like WordPress is the top blogging platform out there
    right now. (from what I’ve read) Is that what you’re using on your blog?

  3. website link

    I am not very good with English but I get hold this real easygoing to interpret.

  4. go to the website

    I conceive you have observed some very interesting details, thanks for the post.

  5. dani

    “I really like your writing style, good info, thanks for posting. “Let every man mind his own business.”

  6. id303

    Wih Mantap Banget keep Post yah Mas… numpang mampir nawarin produk yah… bagi yg menyukai ngebet ataaupun main game online bisa mampir ke laman kita yah di id303 :)

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *